Cuenca Rural

Martes 01.06.2010La excreción de patógenos como Mycobacterium bovis y Mycobacterium avium subsp paratuberculosis desde la glándula mamaria de vacas infectadas es intermitente, pero resulta peligroso para la transmisión de Tuberculosis (TBC) y Paratuberculosis (PTBC) a los terneros alimentados con leche no destinada a consumo humano. Cortar la cadena de trasmisión a través de la pasteurización (PT) de la leche sería deseable en los tambos en saneamiento.

Objetivo

Evaluar la eficacia de eliminación de la micobacteria patógena M. paratuberculosis y saprófita Mycobacterium phlei de leche bovina inoculada experimentalmente y sometida a tratamiento por PT.

Materiales y Métodos

Equipo: Pasteurizador de Leche para Terneros de fabricación nacional, instalado en la localidad de El Trébol, Provincia de Santa Fé. El régimen de PT fue de 300 litros de leche/hora, a 72,5 ºC de temperatura y realizando modificaciones estructurales en el equipo para variar los tiempos de PT. Tratamientos: Se realizó la PT a: 1) 72,5 ºC por 15", 2) 72,5 ºC por 30" o, 3) 72,5 ºC por 60". Entre cada tratamiento el equipo fue sometido a lavado con solución desinfectante y enjuagues para asegurar la limpieza del circuito.

Muestras y estudio bacteriológico: 50 Lts de leche del primer ordeñe proveniente de un tambo de la zona libre de Tuberculosis, fueron mantenidos a 4ºC hasta su procesamiento. Se recolectaron en recipientes estériles 2 muestras de:

A) leche cruda (200 ml) del tarro, y además desde la salida del equipo despúes de cada tratamiento como se describe a continuación:
B) Leche cruda sometida a PT tradicional,
C) Leche cruda inoculada con los siguientes cultivos: *M. paratuberculosis (2,9x106UFC/ml), cepa aislada de leche de bovinos con Paratuberculosis clínica, tipificada por dependencia a micobactina, PCR y RFLP (Patrón genotípico "A") y *M. phlei (4x104 UFC/ml), D) Leche cruda inoculada y sometida a PT a 72,5 ºC por 15", E) Leche cruda inoculada y sometida a la PT a 72,5 ºC por 30", F) Leche cruda inoculada y sometida a la PT a 72,5 ºC por 60".

Los recuentos bacterianos del inóculo se realizaron en duplicado por el método de Miles y Misra por microdilución cultivado sobre medio Herrold-Yema de huevo con micobactina (HYM) en placas de Petri. La leche cruda, o inoculada y sometida a PT y luego de cada tratamiento fue decontaminada con hexadecilpiridinium 0,75% y cultivada en HYM para evidenciar la presencia de las *Micobacterias inoculadas. Los cultivos fueron observados diariamente para identificación del desarrollo de M.phlei y cada 15 días hasta los 4 meses para M.paratuberculosis (1).

Resultados

Las muestras de leche cruda del tambo resultaron negativas a las micobacterias estudiadas, mientras que de las muestras de leche inoculada no PT se recuperaron M.paratuberculosis y M.phlei. En las muestras de leche sometida a PT bajo cualquier tratamiento no fueron recuperadas micobacterias en HEYM. En la Tabla 1 se registran los resultados del estudio bacteriológico.

TABLA 1: Recuento bacteriano de cada inóculo utilizado y detección o no de Micobacterias según el tipo de tratamiento (PT) dado a la leche.

Tipo de Muestra	Temperatura y tiempo	Mycobacterium avium	Mycobacterium phlei
Muestra A	No PT	Negativo	Negativo
Muestra B	72,5°C x 15"	Negativo	Negativo
Muestra C	No PT	Positivo (2,9x106UFC/ml)	Positivo (4,0x104UFC/ml)
Muestra D	72,5°C x 15"	Negativo	Negativo
Muestra E	72,5°C x 30"	Negativo	Negativo
Muestra F	72,5°C x 60"	Negativo	Negativo

Referencias: Muestra A: Leche cruda; Muestra B: Leche cruda pasteurizada a 72,5C°x15"; Muestra C: Leche cruda inoculada no pasteurizada; Muestra D: Leche inoculada pasteurizada a 72,5C°x15"; Muestra E: Leche inoculada pasteurizada a 72,5C°x30"; Muestra F: Leche inoculada pasteurizada a 72,5C°x60".

Conclusiones

Los resultados preliminares del estudio bajo estas condiciones, marcan una adecuada eficiencia del Equipo Pasteurizador para eliminar micobacterias como las estudiadas aquí desde la leche cruda infectada experimentalmente. No se observaron diferencias utilizando cualquiera de los tres tiempos de pasteurización usados, por lo que realizando PT por 15" se reduce el tiempo del proceso respecto a los otros con igual efectividad. La leche cruda utilizada carecía de micobacterias como las estudiadas y contenía al inicio del estudio microorganismos comúnmente encontrados en leche de tambo, pero estos también fueron eliminados por PT. La mayor frecuencia de aislamientos bacterianos en leche provenientes de tambos en Argentina le corresponde a los géneros Staphilococcus spp, Streptococcus spp, Escherichia coli, entre otros, pero informes de frecuencia de aislamientos de M.paratuberculosis no fueron registrados en la bibliografia.

Resulta importante el control de estos microorganismos en leche destinada a la alimentacion en guacheras, pues de lo contrario pueden ser trasmitidos a los terneros durante su etapa de crianza en estaca. Micobacterias tales como M.paratuberculosis que se excretan por leche intermitentemente, responsables de producir y mantener Paratuberculosis en bovinos, deberían ser eliminados antes que los terneros sean alimentados con la leche infectada. Si bien en este estudio preliminar no se probó la eliminación de otras micobacterias restaría comprobar la susceptibilidad de las mismas a la PT con temperaturas similares a las que fueron sometidas las muestras de leche.

Si al menos tal susceptibilidad fuese similar a la que demostró M. paratuberculosis en el estudio, podría asumirse que la PT de la leche bovina bajo estas condiciones destinada al consumo por terneros podría minimizar y contribuir a bajar los riesgos de trasmisión de enfermedades crónicas por vía oral. Para evidenciarlo, otras pruebas deberían realizarse con un esquema similar al diseñado experimentalmente en este trabajo y con un mayor número de repeticiones.

Paolicchi, F.1,2; Verna, A.1,3; Morsella, C.1; Cipolla, A.1 ;Seguro, R.4; Gonzalez, A.5
1Laboratorio de Bacteriología, Departamento de Producción Animal, EEA INTA. 2Facultad de Ciencias Agrarias, UNMdP. CC276, (7620) Balcarce. 3CONICET. 4Asesoramiento Agropecuario "El Prado", Esperanza, Santa Fe. 5Facultad de Veterinaria, UNL, Santa Fe. ARGENTINA.

 

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